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簡要描述:轉染細胞實驗是達為科生物的基礎服務項目之一,由細胞平臺經(jīng)驗豐富的實驗人員操作完成。
詳細介紹
轉染(transfection)指真核細胞由于外源DNA摻入而獲得新的遺傳標志的過程。常規(guī)轉染技術可分為兩大類,一類是瞬時轉染,一類是穩(wěn)定轉染。前者外源DNA/RNA不整合到宿主染色體中,因此一個宿主細胞中可存在多個拷貝數(shù),產(chǎn)生高水平的表達,但通常只持續(xù)幾天。后者也稱穩(wěn)定轉染,外源DNA既可以整合到宿主染色體中,也可能作為一種游離體(episome)存在。盡管線性DNA比超螺旋DNA轉入量低但整合率高。外源DNA整合到染色體中概率很小,大約1/104轉染細胞能整合,通常需要通過一些選擇性標記,如來氨丙基轉移酶(APH;新霉素抗性基因),潮霉素B磷酸轉移酶(HPH),胸苷激酶(TK)等反復篩選,得到穩(wěn)定轉染的同源細胞系。
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