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背景:顱腦外傷(TBI)是世界范圍內(nèi)威脅生命的疾病。大多數(shù)中國人由于運(yùn)動受傷,辦公室或家中意外摔倒以及摩托車受傷而患有TBI。由于社會對疾病的了解不多,因此TBI被稱為“沉默流行病”。TBI后繼發(fā)性腦損傷引起病理,生理和生物學(xué)反應(yīng),導(dǎo)致腦功能障礙。生物和化學(xué)過程通常觸發(fā)連鎖反應(yīng),可導(dǎo)致炎癥細(xì)胞,能量缺乏,興奮性毒性,細(xì)胞凋亡和氧化應(yīng)激。氧化應(yīng)激在上述過程中起重要作用。氧化會增強(qiáng)炎癥和其他反應(yīng),因此促進(jìn)炎癥和其他反應(yīng)會加劇氧化應(yīng)激并形成惡性循環(huán)。氧化應(yīng)激在TBI后一小時發(fā)生,并...
2-25
目的:理解低氧預(yù)處置對子宮內(nèi)膜異位癥大鼠模型異位病灶構(gòu)成的影響,藉此進(jìn)一步說明EMs發(fā)作開展的分子機(jī)制,從而為其防治供新思緒。辦法:Lewis雌性大鼠隨機(jī)分為兩組,分別給予HPC(8%O2)和常壓常氧(21%O2)處置8h,隨即取其子宮組織移植至正常大鼠腹壁。術(shù)后14d記載移植灶體積,并采用ELISA、免疫組化、Westernblot、RT-PCR和Tunnel法,對血清和腹腔液以及移植前子宮組織和移植病灶停止檢測。結(jié)果:HPC可顯著上調(diào)大鼠子宮血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)m...
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一、原理培養(yǎng)的細(xì)胞在一般條件下要求有一定的密度才能生長良好,所以要進(jìn)行細(xì)胞計數(shù)。計數(shù)結(jié)果以每毫升細(xì)胞數(shù)表示。細(xì)胞計數(shù)的原理和方法與血細(xì)胞計數(shù)相同。在細(xì)胞群體中總有一些因各種原因而死亡的細(xì)胞,總細(xì)胞中活細(xì)胞所占的百分比叫做細(xì)胞活力,由組織中分離細(xì)胞一般也要檢查活力,以了解分離的過程對細(xì)胞是否有損傷作用。復(fù)蘇后的細(xì)胞也要檢查活力,了解凍存和復(fù)蘇的效果。用臺盼蘭染細(xì)胞,死細(xì)胞著色,活細(xì)胞不著色,從而可以區(qū)分死細(xì)胞與活細(xì)胞。利用細(xì)胞內(nèi)某些酶與特定的試劑發(fā)生顯色反應(yīng),也可測定細(xì)胞相對數(shù)...
2-18
材料:6孔板marker筆直尺20微升槍頭(滅菌)無血清培養(yǎng)基PBS準(zhǔn)備:所有能滅菌的器械都要滅菌,直尺和marker筆在操作前紫外照射30min(超凈臺內(nèi))流程:1、先用marker筆在6孔板背后,用直尺比著,均勻地劃橫線,大約每隔0.5~1cm一道,橫穿過孔。每孔至少穿過5條線。2、在空中加入約5X105個細(xì)胞,具體數(shù)量因細(xì)胞不同而不同,掌握為過夜能鋪滿。3、第二天用槍頭比著直尺,盡量垂直于背后的橫線劃痕,槍頭要垂直,不要傾斜。4、用PBS洗細(xì)胞3次,去除劃下的細(xì)胞,加入...
2-18
初代培養(yǎng)或原代培養(yǎng),是從供體獲取組織后的培養(yǎng)。組織和細(xì)胞剛剛離體,生物性狀尚未發(fā)生很大的變化,具有二倍體遺傳性狀,在供體來源充分、生物條件穩(wěn)定的情況下(年齡、性別),在一定程度上能反映體內(nèi)狀態(tài)。實驗方法原理消化培養(yǎng)法合成培養(yǎng)基胰蛋白酶消化培養(yǎng)法,能把組織塊分散成細(xì)胞團(tuán)或單個細(xì)胞,便于細(xì)胞從培養(yǎng)液中攝取營養(yǎng)和排出代謝產(chǎn)物,細(xì)胞能較快地長成單層。本法尤適用于培養(yǎng)大量組織,細(xì)胞產(chǎn)量高;但用于經(jīng)常性小量培養(yǎng)工作稍顯繁瑣,無菌操作不良時且易污染。實驗材料組織試劑、試劑盒Hanks培養(yǎng)液...
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原理:腦實質(zhì)內(nèi)注射膠原酶,膠原酶破壞血管的基底層,導(dǎo)致滲漏血液流入周圍組織。動物:雄性SD大鼠,年齡10-12周,體重300-350g。麻醉期間,大鼠體溫維持在37度,體溫維持直到從麻醉狀態(tài)蘇醒,恢復(fù)正常運(yùn)動為止。建模:大鼠麻醉,固定立體定位儀上,在頭皮上做1cm長的中線切口。用棉簽除去覆蓋在大鼠頭皮上的軟組織,確認(rèn)顱骨上的Bregma點位置。右側(cè)鉆孔的位置:Bregma點前0.6mm,側(cè)面2.9mm,微量注射器進(jìn)入基底節(jié),深度距顱骨平面5.5mm。以0.1ul/min速度注...
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藥品:6-OHDAHCl:16μg溶解在4μLACSF中。ACSF:0.15MNaCl,2.75mMKCl,1.2mMCaCl2,and0.85mMMgCl2。動物:雄性Wistar大鼠,重量300-400g。建模:1.大鼠常規(guī)麻醉,然后固定在立體定位儀上。2.暴露大鼠顱骨,在右側(cè)內(nèi)側(cè)前腦束(medialforebrainbundle,MFB)上方鉆孔,孔的坐標(biāo):(AP),-1.9mm,(ML),-1.9mm,(DV),-7.2mm。3.0.5μL/min,注射4ul,為避免...
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