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肢體缺血?jiǎng)游锬P褪沁M(jìn)行缺血損傷機(jī)制、血管新生等研究的基礎(chǔ),成功制作一種效果確切、重復(fù)性強(qiáng)的肢體缺血模型是保證實(shí)驗(yàn)研究能夠順利進(jìn)行的關(guān)鍵。當(dāng)前缺血性疾病患者日漸增多,以糖尿病肢體動(dòng)脈閉塞癥(DAO)、閉塞性動(dòng)脈硬化癥(ASO)和血栓閉塞性脈管炎(TAO)為主的下肢缺血性疾病發(fā)病率逐年增加。國外資料顯示,70歲以上老年人群中僅動(dòng)脈硬化閉塞癥患病率即可達(dá)15%~20%。而患病人群范圍可覆蓋至青壯年,其高發(fā)生率和廣泛累及率已嚴(yán)重危害著人們的身心健康和生存質(zhì)量,亟待探索其發(fā)生機(jī)制、預(yù)防...
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藥品:6-OHDAHCl:16μg溶解在4μLACSF中。ACSF:0.15MNaCl,2.75mMKCl,1.2mMCaCl2,and0.85mMMgCl2。動(dòng)物:雄性Wistar大鼠,重量300-400g。建模:1.大鼠常規(guī)麻醉,然后固定在立體定位儀上。2.暴露大鼠顱骨,在右側(cè)內(nèi)側(cè)前腦束(medialforebrainbundle,MFB)上方鉆孔,孔的坐標(biāo):(AP),-1.9mm,(ML),-1.9mm,(DV),-7.2mm。3.0.5μL/min,注射4ul,為避免...
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1,什么是瞬時(shí)轉(zhuǎn)染和穩(wěn)定轉(zhuǎn)染?瞬時(shí)轉(zhuǎn)染:外源片段的表達(dá)時(shí)間短暫。這主要是因?yàn)橥庠磳?dǎo)入的裸露的載體整合入基因組的幾率非常低,所以以染色體外(episomal)形式存在,不能隨細(xì)胞分裂而一同復(fù)制導(dǎo)致最后拷貝數(shù)被稀釋導(dǎo)致的。而且考慮到細(xì)胞分裂會(huì)稀釋質(zhì)粒的量,所以起初轉(zhuǎn)染的質(zhì)??截悢?shù)*。這就導(dǎo)致瞬時(shí)轉(zhuǎn)染呈現(xiàn)一個(gè)高拷貝到低拷貝迅速降低的過程,且無法在這個(gè)系統(tǒng)上實(shí)現(xiàn)可誘導(dǎo)表達(dá)。穩(wěn)定轉(zhuǎn)染:是相對瞬時(shí)轉(zhuǎn)染而言,進(jìn)入細(xì)胞的質(zhì)粒整合入細(xì)胞基因組中,并能隨細(xì)胞分裂穩(wěn)定傳遞下去。在這個(gè)系統(tǒng)中,質(zhì)粒表...
12-24
肝纖維化動(dòng)物模型化學(xué)性損傷法:雄性Wistar大鼠,體重130g左右,用硫代乙酰胺腹腔內(nèi)注射,第1次20mg/100g體重,從第二次起12mg/100g體重,每周注射2次,共8周。評價(jià):第3周,在肝小葉間中間帶出現(xiàn)大片的肝細(xì)胞變性壞死和炎細(xì)胞浸潤,炎細(xì)胞浸潤、壞死細(xì)胞數(shù)和程度超過豬血清模型。6周后出現(xiàn)增生纖維束,纖維增生晚于和少于豬血清模型。大鼠肝纖維組織中有I型膠原的mRNA增多。肝纖維化動(dòng)物模型四氯化碳法:180~200gWistar或SD大鼠,皮下注射40%-50%CC...
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.將水迷宮加入適當(dāng)?shù)乃?,水溫控制?5±1℃。2.實(shí)驗(yàn)前把動(dòng)物帶入實(shí)驗(yàn)室中熟悉環(huán)境。3.設(shè)置軟件。4.第一階段:(定位航行)將小鼠頭對著墻壁依次放入四個(gè)象限水迷宮進(jìn)行實(shí)驗(yàn)(所有大鼠需全部做完后換下一象限)。若動(dòng)物在60s內(nèi)登上平臺(tái)區(qū)域,則錄像結(jié)束。若動(dòng)物在60s內(nèi)未登上平臺(tái)區(qū)域,則用木棍指引大鼠游上平臺(tái),并停留30s。每只小鼠每天訓(xùn)練4次,訓(xùn)練天數(shù)為5天。5.每只動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)束后需用干毛巾擦拭,必要時(shí)需要使用電吹風(fēng)吹干。6.第二階段(空間探索):待第一到第四象限全...
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科研實(shí)驗(yàn)優(yōu)勢:1.獨(dú)立實(shí)驗(yàn)室和動(dòng)物中心:實(shí)驗(yàn)室面積600多平方米,動(dòng)物中心1000平方米,公司目前具備較好的的生物學(xué)、醫(yī)學(xué)技術(shù)服務(wù)平臺(tái),能夠?yàn)閺V大客戶提供醫(yī)學(xué)科研樣本檢測、合作研究、開發(fā)及生產(chǎn)服務(wù);2.專業(yè)的技術(shù)人員:技術(shù)團(tuán)隊(duì)包括研究員(博士后)2人,助理研究員(博士)4人,核心研究員(碩士)15人;科研實(shí)驗(yàn)介紹:1.基因組學(xué):基因芯片、SNP檢測、DNA甲基化檢測、生物信息學(xué)分析2.轉(zhuǎn)錄組學(xué):microRNA芯片、LncRNA芯片、表達(dá)譜芯片、RNA-seq3.蛋白質(zhì)組學(xué):...
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大鼠腦缺血再灌注損傷模型模型:麻醉大鼠,然后在頸部中線切開一個(gè)切口,暴露頸外動(dòng)脈和頸內(nèi)動(dòng)脈,用無菌縫合線結(jié)扎,血管夾夾住頸內(nèi)動(dòng)脈。隨后在頸總動(dòng)脈上切口,然后插入線栓。2h后,大鼠進(jìn)行再灌注。模型大鼠成功構(gòu)建的標(biāo)準(zhǔn):大鼠出現(xiàn)癥狀如偏癱,對側(cè)前肢下垂和站立不穩(wěn)。Bederson評分在1-3分,48小時(shí)內(nèi)沒有死亡,就認(rèn)為模型成功。文獻(xiàn)上用的是2-3分的模型。優(yōu)點(diǎn):無需開顱,創(chuàng)傷較??;缺血部位相對固定,可控性好;可實(shí)現(xiàn)腦缺血后再灌注,是理想的標(biāo)準(zhǔn)局灶性腦缺血?jiǎng)游锬P?。?dòng)物選擇:目前多...
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